一、試劑準備 1、SDS-PAGE 試劑：見聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗。 2、勻漿緩沖液：1.0 M Tris-HCl(pH 6.8) 1.0 ml；10%SDS 6.0 ml；β-巰基乙醇 0.2 ml；ddH2O 2.8 ml。 3、轉(zhuǎn)膜緩沖液：甘氨酸 2.9 g；Tris 5.8 g；SDS 0.37 g；甲醇 200 ml；加 ddH2O 定容至 1000 ml。 4.、0.01 M PBS(pH7.4)：NaCl 8.0 g；KCl 0.2 g；Na2 HPO4 1.44 g；KH2PO40.24 g；加 ddH2O 至 1000 ml。 5、膜染色液：考馬斯亮蘭 0.2 g；甲醇 80 ml；乙酸 2 ml；ddH2O118 ml。包被液（5% 脫脂奶粉，現(xiàn)配）：脫脂奶粉 1.0 g 溶于 20 ml 的 0.01 M PBS 中。 6、顯色液：DAB 6.0 mg；0.01 M PBS 10.0 ml；硫酸鎳胺 0.1 ml；H202 1.0 μl。
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免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質(zhì)印跡（Western blotting），是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測，可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。
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根據(jù)衛(wèi)生部規(guī)定，HIV抗體陽性報告必須由衛(wèi)生部認證并取得資格的艾滋病病毒抗體確認實驗室出具才有法律效應(yīng)。最常用的HIV抗體確認實驗方法是免疫印跡法（Western Blot，WB）。HIV抗體確認實驗結(jié)果的評價：免疫印跡實驗的結(jié)果是根據(jù)硝酸纖維素條膜特異性HIV抗原位置上出現(xiàn)的帶型不同來判斷HIV抗體為陽性、陰性和不確定。
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